Hologic ThinPrep Guide de référence

Liquides biologiques ThinPrep®
Guide de référence rapide
(Épanchements séreux, urine et liquide céphalo-rachidien)
AVERTISSEMENT : ne pas traiter sur le processeur ThinPrep un échantillon de liquide céphalo-rachidien (LCR) ni tout autre
type d’échantillon suspecté de présenter une infectiosité par les prions (PrPsc) provenant d’une personne atteinte d’une
encéphalopathie spongiforme transmissible (EST), comme la maladie de Creutzfeldt-Jakob. Un processeur contaminé par
une EST ne peut pas être décontaminé efficacement et doit donc être éliminé correctement afin de ne pas présenter de
risques pour les utilisateurs du processeur en question ou pour le technicien de maintenance.
1. Prélèvement.
Recueillir des liquides biologiques frais.
Remarque :
• Les liquides recueillis dans la solution
CytoLyt® doivent être également
lavés avec la solution CytoLyt avant
d’être traités sur l’appareil.
• En cas de liquides contenant
beaucoup de sang (péricardiques,
par exemple), commencer avec
seulement 10 ml de liquide frais.
• Seule l’urine peut être recueillie dans
la solution PreservCyt®. Un rapport
de 2/1 (2 volumes d’échantillon
d’urine pour 1 volume de solution
PreservCyt) est requis. Le kit de
prélèvement d’urine ThinPrep
UroCyte® est recommandé.
5. Évaluer l’aspect du culot.
Se reporter à la procédure B au
verso de ce guide.
6. Ajouter une quantité appropriée
d’échantillon (en fonction de
la taille du culot) au flacon de
solution PreservCyt.
Se reporter à la procédure C au
verso de ce guide.
7. Laisser reposer dans la solution
PreservCyt pendant 15 minutes.
Th
in
Pr
ep
ü
2. Concentrer par centrifugation.
Centrifuger à 600 g pendant
10 minutes ou à 1 200 g pendant
5 minutes.
3. Éliminer le surnageant et remettre
le culot en suspension.
Se reporter à la procédure A au verso
de ce guide.
30 ml
8. Procéder au traitement sur le
processeur ThinPrep 2000 selon
la séquence 2 (FLU/FNA) ou sur
le processeur ThinPrep 5000
selon la séquence Non gyn.
Fixer, colorer et évaluer.
4. Laver avec la solution CytoLyt.
• Ajouter 30 ml de solution CytoLyt.
• Centrifuger.
• Éliminer le surnageant.
• Remettre le culot en suspension.
Hologic fournit ce guide de référence rapide (« guide ») sur les liquides biologiques ThinPrep en tant qu’outil d’information général ; il ne constitue ni une instruction positive ni une garantie. Bien que les informations fournies dans ce
guide puissent décrire une technique particulière ou un protocole particulier, elles n’ont pas pour but de constituer une approbation et/ou une exigence de la part de Hologic quant à l’utilisation d’une telle technique ou d’un tel protocole. Le laboratoire est seul responsable de la détermination de la technique et/ou du protocole spécifique à employer. Les laboratoires utilisant les produits ThinPrep ou PreservCyt doivent lire et bien comprendre le mode d’emploi
de chaque produit et se conformer aux règles et réglementations locales et nationales applicables.
SOLUTIONS DIAGNOSTIQUES
Liquides biologiques
Procédure A
Éliminer le surnageant et agiter au vortex pour remettre le culot
en suspension.
Figure 1.
Élimination du surnageant
DÉBUT
Éliminer tout le surnageant afin de concentrer efficacement l’échantillon.
À cet effet, renverser le tube à centrifuger de 180 degrés en un mouvement
lent et régulier, éliminer tout le surnageant et remettre le tube dans sa
position initiale, comme indiqué à la Figure 1. Surveiller le culot pendant
cette manipulation pour éviter toute perte accidentelle de matériel cellulaire.
Attention : si le surnageant n’est pas entièrement éliminé, le culot reste dilué et
pourra produire un échantillon clairsemé et une lame peu satisfaisante.
Cette remise en suspension peut s’effectuer à l’agitateur vortex ou être obtenue
en aspirant et en refoulant le culot à l’aide d’une pipette en plastique.
Procédure B
Évaluer l’aspect du culot.
Aspect du culot
Procédure
Le culot est blanc, rose pâle, beige ou invisible.
Ajouter l’échantillon au flacon de solution PreservCyt®. Voir la procédure C.
Le culot est rouge ou brun, ce qui indique la présence
de sang.
Laver avec la solution CytoLyt®.
- Ajouter 30 ml de solution CytoLyt.
- Concentrer par centrifugation.
- Éliminer le surnageant et agiter au vortex pour remettre le culot
en suspension.
Le culot est mucoïde (non liquide).
Pour apprécier la fluidité, prélever une petite quantité
d’échantillon dans une pipette et en laisser retomber
quelques gouttes dans le tube.
Si les gouttes semblent filandreuses ou gélatineuses,
le mucus exige alors une fluidification supplémentaire.
Laver avec la solution CytoLyt.
- Ajouter 30 ml de solution CytoLyt.
- Procéder à une agitation mécanique.
- Concentrer par centrifugation.
- Éliminer le surnageant et agiter au vortex pour remettre le culot
en suspension.
Procédure C
Ajouter l’échantillon au flacon de solution PreservCyt.
Déterminer la taille du culot et consulter le tableau ci-après :
Taille du culot
Solutions diagnostiques
|
Procédure
Le culot est clairement visible et
son volume est inférieur à 1 ml.
Placer le tube à centrifuger dans un agitateur vortex pour remettre les
cellules en suspension dans le liquide résiduel ou mélanger le culot en
l’aspirant et en le refoulant manuellement à l’aide d’une pipette.
Transférer 2 gouttes du culot dans un flacon de solution PreservCyt fraîche.
Le culot n’est pas ou est très
peu visible.
Ajouter le contenu d’un flacon de solution PreservCyt fraîche de 20 ml
dans le tube.
Agiter brièvement au vortex pour mélanger la solution et reverser la totalité
de l’échantillon dans le flacon de solution PreservCyt.
Le volume du culot est supérieur
à 1 ml.
Ajouter 1 ml de solution CytoLyt dans le tube. Agiter brièvement au vortex
pour remettre le culot en suspension. Transférer 1 goutte de l’échantillon
dans un flacon de solution PreservCyt fraîche.
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