Eau peptonée tamponnée
DOMAINE D’UTILISATION
L’eau peptonée tamponnée est un diluant destiné à la préparation des suspensions mères de laits en
poudre et concentrés, de yaourts, de produits laitiers, de produits d’origine animale et d’autres
produits alimentaires.
Ce milieu est également utilisé pour le préenrichissement préalable aux phases d’enrichissement
sélectif et d’isolement des salmonelles en permettant notamment de revivifier les microorganismes
ayant subi des traitements sublétaux.
Il est utilisé comme milieu de suspension et de revivification pour le dénombrement des Listeria
monocytogenes.
Il est aussi employé pour effectuer les dilutions en vue de l’examen microbiologique.
PRINCIPES
- La méthode préconisant le préenrichissement des salmonelles est utilisée pour la revivification des
microorganismes ayant subi des dommages au cours des traitements industriels de conservation
des aliments tels que : atomisation, pasteurisation, ajout de conservateurs, pressions osmotiques
élevées, fortes acidités...
- Le chlorure de sodium maintient l’équilibre osmotique.
- Le milieu est tamponné au moyen des phosphates.
PREPARATION
- Mettre en solution 25,5 g de milieu déshydraté (BK018) ou 20,0 g (BK131) dans 1 litre d’eau
distillée ou déminéralisée.
- Agiter lentement, jusqu’à dissolution complète.
- Répartir en tubes ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 15 minutes.
MODE D’EMPLOI
Préparation des solutions ou des suspensions mères
- Refroidir à 25°C.
- Introduire aseptiquement 10 ou 25 g de produit à analyser dans un flacon taré contenant 90 ou
225 mL de milieu ainsi préparé (ou de milieu prêt-à-l’emploi BM057, BM010).
- Homogénéiser parfaitement au moyen d'un appareil de broyage de façon à obtenir une
suspension mère ou un bouillon de préenrichissement.
- Incuber en respectant le protocole analytique approprié.
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Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
NOTA :
La présentation en poches de milieu prêt-à-l’emploi en 3 litres (BM131) ou en 5 litres (BM132) permet
d’utiliser un appareil automatique pour la préparation des suspensions mères (se reporter aux notices
d’utilisation des appareils automatiques de distribution employés).
Préparation des dilutions décimales
- Introduire 1 mL de suspension mère dans un tube contenant 9 mL de milieu ainsi préparé ou du
milieu prêt-à-l’emploi (BM056).
- Homogénéiser parfaitement.
- Recommencer l’opération jusqu’à l’obtention de la dilution souhaitée.
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu (BK018, BM010, BM056, BM057, BM131, BM132) :
- Peptone..........................................................................................10,0 g
- Chlorure de sodium..........................................................................5,0 g
- Phosphate disodique dodécahydraté...............................................9,0 g
- Phosphate monopotassique ............................................................1,5 g
Pour 1 litre de milieu (BK131) :
- Peptone........................................................................................10,00 g
- Chlorure de sodium........................................................................5,00 g
- Phosphate disodique anhydre .......................................................3,56 g
- Phosphate monopotassique ..........................................................1,50 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,0 ± 0,2.
CONTRÔLE QUALITE
- Milieux déshydratés : poudre blanc crème, fluide et homogène.
- Milieux préparés : solution ambrée, limpide, pouvant présenter un très léger précipité après
conservation.
- Réponse culturale typique selon le protocole de contrôle :
Microorganismes
(1)
Salmonella Typhimurium
(1)
Salmonella Enteritidis
(2)
Listeria monocytogenes
(2)
Listeria monocytogenes
(3)
Escherichia coli
(3)
Staphylococcus aureus
Croissance
ATCC® 14028
CIP 82.97
CIP 59.53
CIP 78.31
ATCC 25922
ATCC 25923
positive
positive
± 50% colonies / T0
± 50% colonies / T0
± 50% colonies / T0
± 50% colonies / T0
(1)
18 heures d’incubation à 37°C (inoculum 102 microorganismes)
60 minutes d’incubation à 20°C
(3)
45 minutes d’incubation à 20-25°C
(2)
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STOCKAGE / CONSERVATION
Milieux déshydratés : 2-30°C.
- Les dates de péremption sont mentionnées sur les étiquettes.
- Milieux préparés en flacons ou en tubes : 6 mois à 2-25°C (à titre indicatif).
Milieux prêts-à-l’emploi en flacons ou en poches :
- Stocker entre 2 et 25°C, à l’abri de la lumière.
- Les dates de péremption sont mentionnées sur les étiquettes.
PRESENTATION
Code
Milieu prêt-à-l’emploi en tubes :
- Coffret de 50 tubes de 9 mL
BM05608
Milieu prêt-à-l’emploi en flacons :
- Pack de 10 flacons de 225 mL
- Pack de 10 flacons de 90 mL
BM01008
BM05708
Milieu prêt-à-l’emploi en poches souples :
- Carton de 3 poches souples de 3 litres
- Carton de 2 poches souples de 5 litres
BM13108
BM13208
Milieu déshydraté (25,5 g/L) :
- Flacon de 500 g
- Fût de 5 kg
BK018HA
BK018GC
Milieu déshydraté (20 g/L) :
- Flacon de 500 g
- Fût de 5 kg
BK131HA
BK131GC
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
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NF V 08-407. Octobre 1989. Microbiologie alimentaire. Matières premières entrant dans la composition des conserves.
Dénombrement des spores thermorésistantes de Bacillus et Clostridium thermophiles. Technique du nombre le plus
probable.
ISO 6340. Décembre 1995. Qualité de l’eau. Recherche de Salmonella.
NF EN ISO 11290-2 (V 08-028-2). Août 1998. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour la recherche et le
dénombrement de Listeria monocytogenes. Partie 2 : Méthode de dénombrement.
NF EN ISO 6887-1 (V 08-010-1). Septembre 1999. Microbiologie des aliments. Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique. Partie 1 : Règles générales pour la
préparation de la suspension mère et des dilutions décimales.
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de routine.
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XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production
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ISO/TS 22964 – IDF/RM 210. Février 2006. Lait et produits laitiers. Détection de l’Enterobacter sakazakii.
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dans les boues, les sols, les amendements du sol, les supports de culture et les biodéchets. Partie 3 : Présence/absence
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sérovar(s) spécifié(s) de salmonelles chez les oiseaux.
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sérovar(s) spécifié(s) de salmonelles chez les mammifères.
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Pr NF EN ISO 19250 (T 90-435). Mars 2008. Qualité de l’eau. Dosage d’espèces de Salmonella.
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colonies obtenues à 44°C.
NF V08-054. Avril 2009. Microbiologie des aliments. Dénombrement des entérobactéries présumées par comptage des
colonies obtenues à 30°C ou à 37°C.
NF V08-050. Avril 2009. Microbiologie des aliments. Dénombrement des coliformes présumés par comptage des colonies
obtenues à 30°C .
Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-07-23.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK018/F/2003-06 : 12.
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