Roche VENTANA PD-L1 (SP263) Assay, CE IVD PREDICTIVE, Bladder Manuel utilisateur

Test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour
la coloration du carcinome urothélial
Guide d’interprétation
2
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Table des matières
Introduction4
Utilisation prévue du produit
4
Objectif du Guide d’interprétation
4
Évaluation clinique
Évaluation des profils et de l’intensité de coloration Exigences relatives aux tissus Critères d’acceptabilité de la morphologie et du fond
Tissu de contrôle positif
Algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour le tissu de carcinome urothélial
Présentation de l’algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour le carcinome urothélial
Évaluation de la coloration des cellules immunitaires
5
5
10
10
11
12
14
16
Atlas d’expression de la PD-L1 dans le carcinome urothélial
Cas de cellules tumorales Cas de cellules immunitaires 25
25
31
Cas difficiles
39
Cas difficiles : faible coloration membranaire des cellules tumorales par rapport à faible coloration
cytoplasmique40
Cas difficiles : chevauchement d’une forte coloration des cellules immunitaires et de la coloration des
cellules tumorales
42
Cas difficiles : cas avec de multiples fragments de tissus
44
Cas difficiles : état limite de la PD-L1
45
Cas difficiles : Matériel endogène gênant48
Répercussion des conditions préanalytiques sur la coloration par
le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay
Recommandations de fixation pour obtenir des résultats de coloration optimaux avec
le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay
Influence de l’épaisseur des tissus sur la coloration par le test
Stabilité des lames
50
50
51
51
Références51
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
3
Introduction
Le carcinome urothélial (aussi appelé carcinome à cellules
transitionnelles de la vessie ou cancer urothélial de la vessie) est le
type de cancer de l’appareil urinaire le plus fréquent au monde. La
plupart des tumeurs urothéliales se développent dans la vessie. Dans
le reste des cas, elles apparaissent dans le bassinet du rein, dans
l’urètre ou dans l’uretère. Le carcinome à cellules transitionnelles
(CCT) est le sous-type histologique associé au cancer de la vessie
le plus fréquent et représente plus de 90 % des cas de carcinome
urothélial dans les pays industrialisés. Les sous-types non urothéliaux
(p. ex., carcinome épidermoïde, adénocarcinome, carcinome à petites
cellules) sont plus fréquents dans d’autres régions du monde.1
À l’échelle mondiale, on estimait à 429 793 le nombre de nouveaux
cas de cancer de la vessie et à 165 084 le nombre de décès en 2012. 2
Rien qu’en Europe, en 2012, il y a eu environ 151 297 nouveaux cas
de cancer de la vessie et 52 411 décès. En 2015, on a estimé qu’il y
aurait 74 000 nouveaux cas de cancer de la vessie et 16 000 décès aux
États-Unis.3 Le carcinome urothélial se présente comme une maladie
non musculo-invasive, musculo-invasive ou métastatique. Le taux de
survie globale de cinq ans pour le carcinome urothélial métastatique
(CUm) est d’environ 5,4 %.4
La PD-L1 est une protéine transmembranaire qui diminue les réponses
immunitaires en se liant à deux de ses récepteurs, PD-1 (mort cellulaire
programmée 1) et B7-1 (CD80).5 PD-1 est un récepteur inhibiteur exprimé
sur les lymphocytes T suite à l’activation de ces derniers, cette activation
perdurant en état de stimulation chronique comme dans les cas
d’infection chronique ou de cancer.6 La liaison de la PD-L1 et de la PD-1
empêche la prolifération des lymphocytes T, la production des cytokines
et l’activité cytolytique, ce qui entraîne l’inactivation fonctionnelle ou
l’épuisement des lymphocytes T. CD80 est une molécule exprimée sur
les cellules présentatrices d’antigène et les lymphocytes T activés. La
liaison de la protéine PD-L1 et du récepteur CD80 sur les lymphocytes T
et les cellules présentatrices d’antigène peut entraîner une diminution
des réponses immunitaires, y compris l’inhibition de l’activation des
lymphocytes T et la production des cytokines.7 L’expression de la PD-L1
sur les cellules immunitaires et tumorales a été observée.8,9 L’expression
aberrante de la PD-L1 sur les cellules tumorales ou les cellules
immunitaires associées à la tumeur semblerait entraver l’immunité
antitumorale, résultant en une évasion immunitaire.6,9 L’interruption de
la voie PD-L1/PD-1 représente donc une stratégie intéressante pour
redynamiser l’immunité des lymphocytes T spécifiques de la tumeur
supprimée par l’expression de la PD-L1 dans le microenvironnement
tumoral. La PD-L1 est exprimée dans un large éventail de cancers, dont
le cancer du poumon, le mélanome, le cancer urothélial, le cancer de
l’ovaire et le cancer colorectal. Une prévalence de l’expression de la
PD-L1 de 12 % à 100 % a été rapportée, selon le type de tumeur, le clone
anti-PD-L1 et le seuil de positivité.10
Utilisation prévue du produit
Le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay est un test
d’immunohistochimie utilisant le clone anti-PD-L1 monoclonal
de lapin SP263 pour la détection qualitative de la protéine PD-L1
4
dans des tissus de carcinome urothélial fixés au formol, inclus en
paraffine (FFPE) et colorés avec le kit de détection OptiView DAB IHC
Detection Kit sur les appareils BenchMark IHC/ISH.
L’état de la PD-L1 est déterminé par le pourcentage de cellules
tumorales présentant toute coloration membranaire au-delà de la
coloration de fond ou par le pourcentage de cellules immunitaires
associées à la tumeur présentant une coloration (IC +), quelle que soit
l’intensité au-delà de la coloration de fond. Le pourcentage de la zone
tumorale occupé par les cellules immunitaires associées à la tumeur
(cellules immunitaires présentes, ICP) est utilisé pour déterminer IC +,
c’est-à-dire le pourcentage de la zone d’ICP présentant une coloration
des cellules immunitaires positive à la PD-L1. L’état de la PD-L1 est
considéré comme élevé si l’un des critères suivants est rempli :
•
≥ 25 % des cellules tumorales présentent une coloration
membranaire ; ou,
•
ICP > 1 % et IC + ≥ 25 % ; ou,
•
ICP = 1 % et IC + = 100 %.
L’état élevé de la PD-L1, déterminé par le test VENTANA PD-L1 (SP263)
Assay, a été associé à une augmentation du taux de réponse objective
(ORR) lors d’une étude à un seul bras d’IMFINZI™ (durvalumab).
Ce produit est conçu pour être utilisé en diagnostic in vitro (DIV).
Objectif du Guide d’interprétation
Le présent guide vise à aider les pathologistes lors de l’évaluation
clinique des coupes de tissu de carcinome urothélial fixées au formol,
incluses en paraffine (FFPE) et colorées avec le test en utilisant les
algorithmes d’évaluation, conformément à l’étiquetage proposé du
produit. Plus précisément, ce guide :
• Fournit aux pathologistes un outil pour faciliter l’évaluation
des coupes de tissu de carcinome urothélial fixées au formol,
incluses en paraffine (FFPE) et colorées avec le test en utilisant les
algorithmes d’évaluation, conformément à l’étiquetage proposé du
produit.
• Contient des clichés photographiques qui illustrent les profils et
l’intensité de coloration résultant de la coloration d’échantillons de
tissus de carcinome urothélial avec le test.
• Fournit des indications pour l’utilisation de tissu placentaire en tant
que tissu de contrôle lorsqu’il est coloré avec le test.
• Fournit des clichés photographiques de contrôles internes.
• Fournit une référence pour associer des profils de coloration à des
scores spécifiques de PD-L1.
• Fournit des exemples d’images illustrant les cas difficiles afin de
faciliter leur évaluation.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Évaluation clinique
Évaluation des profils et de l’intensité de coloration
Les cas de carcinome urothélial colorés avec le test sont évalués pour
déterminer le pourcentage de cellules tumorales avec coloration
membranaire et le pourcentage de cellules immunitaires associées
à la tumeur avec coloration membranaire, cytoplasmique ou
punctiforme.
Coloration des cellules tumorales :
Les cellules tumorales de carcinome urothélial marquées avec le test
sont évaluées afin de déterminer le pourcentage de cellules tumorales
avec coloration membranaire, quelle que soit l’intensité du signal
DAB (diaminobenzidine). La coloration immunohistochimique des
tissus de carcinome urothélial est membranaire ou cytoplasmique,
et peut être exprimée de manière homogène ou hétérogène dans
tout le néoplasme. La coloration membranaire peut avoir un
profil circonférentiel total ou partiel. La coloration cytoplasmique
est généralement diffuse bien que certains cas soient finement
granulaires. La coloration cytoplasmique des cellules tumorales n’est
pas évaluée pour déterminer l’expression de la PD-L1. Le pourcentage
total d’intensités de signal membranaire est estimé visuellement et
utilisé pour générer le niveau d’expression de la PD-L1. Un anticorps
de contrôle négatif correspondant à l’isotype est utilisé pour évaluer
la présence d’une coloration de fond dans les échantillons testés et
établir une intensité de coloration de référence.
Carcinome urothélial, H&E et test : divers cas présentant la plage de coloration membranaire et cytoplasmique dans les cellules tumorales (10X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
5
Carcinome urothélial, H&E et test : cellules tumorales avec profil de coloration membranaire circonférentielle (flèche noire) et partielle (flèche bleue) (20X)
Carcinome urothélial, H&E et test : cellules tumorales avec profil de coloration membranaire faible (flèche bleue) (20X)
Carcinome urothélial, H&E et test : cellules tumorales présentant une coloration membranaire et cytoplasmique granulaire faible (40X)
6
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Coloration des cellules immunitaires associées à la tumeur :
Les cellules immunitaires présentent toute une gamme d’intensités
et de profils de coloration : de négative à cytoplasmique diffuse
faible, ou signal membranaire faible à fort. Un profil de coloration
punctiforme peut être observé en association avec des lymphocytes.
L’expression de la PD-L1 a été constatée dans des lymphocytes,
des macrophages, des histiocytes, des cellules plasmatiques et des
neutrophiles.
Le pourcentage de cellules immunitaires associées à la tumeur
colorées dans les cas de carcinome urothélial est évalué en plus
de la coloration des cellules tumorales. La coloration des cellules
immunitaires est évaluée en examinant d’abord toute la zone tumorale
et en déterminant le pourcentage de la zone tumorale occupé par
les cellules immunitaires (ICP). Ensuite, le pourcentage de cellules
immunitaires présentant tout profil d’expression de la PD-L1 dans la
zone tumorale est estimé visuellement (IC +).
Carcinome urothélial, H&E et test : plusieurs cas illustrant la plage et les profils de coloration des cellules immunitaires (10X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
7
Carcinome urothélial, H&E et test : coloration positive des macrophages (contour bleu) avec tumeur adjacente négative à la PD-L1 (20X)
Carcinome urothélial, H&E et test : coloration punctiforme (contour bleu) et membranaire (flèche noire) des cellules immunitaires avec tumeur adjacente négative à la PD-L1
(20X)
Carcinome urothélial, H&E et test : cellules immunitaires éparses présentant une coloration punctiforme infiltrant la tumeur (exemple unique encerclé en bleu) (20X)
8
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
NSCLC, H&E et test : cas avec une rare infiltration par neutrophiles uniquement (flèche bleue) dans la tumeur présentant une coloration par PD-L1. Une coloration membranaire
des cellules tumorales est également présente (flèche noire) (40X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
9
Exigences relatives aux tissus
Le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay nécessite une coupe de
tissu en série pour la coloration H&E (hématoxyline et éosine), une
deuxième coupe de tissu en série pour la coloration avec l’anticorps
de contrôle négatif et une troisième coupe de tissu en série pour la
coloration avec le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay. En outre, le
tissu placentaire humain sain à terme peut être utilisé comme tissu
de contrôle pour le test PD-L1 (SP263) Assay. Ce tissu présente
une coloration uniforme modérée à forte de la membrane et une
coloration uniforme faible à forte du cytoplasme des cellules de
la lignée trophoblastique. Les vaisseaux et le tissu du stroma
placentaire peuvent être utilisés pour évaluer toute coloration du
fond. Si l’évaluation H&E indique que l’échantillon patient n’est pas
adéquat, un nouvel échantillon doit alors être prélevé. La coloration
d’un échantillon doit être répétée sur des lames non colorées si (1) la
lame du tissu de contrôle ne présente pas de coloration acceptable ;
(2) la lame du cas de contrôle négatif ne présente pas de coloration
acceptable ; ou (3) la lame du cas colorée avec le test VENTANA
PD-L1 (SP263) Assay (la lame PD-L1 IHC) ne peut pas être évaluée.
Si la dernière de ces lames ne peut pas être interprétée en raison
d’artefacts, d’effets de contour, d’une nécrose, d’un manque de tissu,
ou pour toute autre raison, alors la lame ne peut être utilisée pour
l’évaluation clinique. Si les contrôles sont acceptables et si la lame
colorée à l’aide du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay peut être
évaluée, la lame peut être évaluée par un pathologiste qualifié comme
indiqué dans les Critères d’évaluation.
Critères d’acceptabilité de la morphologie et du fond
L’acceptabilité de la morphologie et du fond est évaluée pour chaque cas de patient à l’aide des critères décrits dans les tableaux 1 et 2.
Tableau 1 : Critères d’acceptabilité de la morphologie
Interprétation
Observation au microscope
Acceptable
Les éléments cellulaires d’intérêt sont visualisés, ce qui permet une interprétation de la coloration.
Inacceptable
Les éléments cellulaires d’intérêt ne sont pas visualisés, ce qui compromet l’interprétation de la coloration.
Tableau 2 : Critères d’acceptabilité du fond
10
Interprétation
Observation au microscope
Acceptable
Coloration non spécifique qui n’est pas gênante pour l’interprétation de la coloration spécifique.
Inacceptable
Coloration non spécifique gênante pour l’interprétation de la coloration spécifique.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Tissu de contrôle positif
Un tissu de contrôle positif connu, fixé et traité de la même manière
que les échantillons de patients, doit être testé pour chaque
ensemble de conditions de test et lors de chaque procédure de
coloration réalisée avec le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay.
Le tissu de contrôle (un cas de référence) doit être un prélèvement
récent d’autopsie, de biopsie ou de chirurgie, préparé et fixé dès
que possible d’une manière identique aux échantillons de patients.
Ces tissus peuvent être utilisés pour contrôler toutes les étapes de
traitement et de coloration des échantillons. Une coupe de tissu
fixée ou traitée différemment de l’échantillon testé peut être utilisée
comme contrôle pour les réactifs et la coloration, mais non pour la
fixation ou préparation des tissus. Un cas de carcinome urothélial
positif avec coloration modérée est plus adapté au contrôle qualité
qu’un cas qui présente une coloration forte, car il pourra être utilisé
pour détecter des niveaux mineurs de dégradation des réactifs ou
des problèmes hors spécifications pouvant être liés à l’appareil. La
coloration positive de la membrane des cellules néoplasiques dans
le tissu de contrôle sert à confirmer que l’anticorps VENTANA PD-L1
(SP263) a été appliqué et que l’appareil fonctionne correctement.
Le tissu de contrôle positif ne doit être utilisé que pour contrôler les
performances et non pour aider à établir un diagnostic clinique des
échantillons de patients. De plus, le test VENTANA PD-L1 (SP263)
Assay peut utiliser comme contrôle positif du tissu placentaire
humain à terme, qui présente une coloration uniforme modérée à
forte de la membrane et une coloration uniforme faible à forte du
cytoplasme des cellules de la lignée trophoblastique. Les vaisseaux et
le tissu du stroma placentaire peuvent être utilisés pour évaluer toute
coloration du fond. Veuillez vous reporter au tableau 3.
Placenta, VENTANA PD-L1 (SP263) Assay : coloration membranaire uniforme forte et
coloration cytoplasmique modérée des cellules de la lignée trophoblastique (10X)
Placenta, VENTANA PD-L1 (SP263) Assay : stroma et vaisseaux des villosités ne
présentant aucune coloration PD-L1 (20X)
Tableau 3 : Critères d’évaluation du tissu placentaire de contrôle pour le test Ventana PD-L1 (SP263) Assay
Acceptable
Inacceptable
Coloration membranaire uniforme modérée à forte des cellules de la lignée trophoblastique, et stroma et vaisseaux placentaires
incolorés.
Coloration membranaire uniforme inexistante à faible des cellules de la lignée trophoblastique ou coloration spécifique des tissus
stromaux et vasculaires placentaires.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour le tissu de carcinome urothélial
L’état et le niveau d’expression de la PD-L1 sont attribués par un pathologiste qualifié en fonction de son évaluation du pourcentage de
coloration spécifique des cellules tumorales et des cellules immunitaires associées à la tumeur. L’état de la PD-L1 est fondé sur le pourcentage
total de cellules tumorales présentant une coloration membranaire ou le pourcentage total de cellules immunitaires associées à la tumeur
présentant une coloration (IC +), quelle qu’en soit l’intensité. Plus précisément, ce guide met en évidence un niveau d’expression supérieur ou
égal à 25 % des cellules tumorales avec coloration membranaire ou des cellules immunitaires associées à la tumeur avec coloration. Dans les
cas où le pourcentage de cellules immunitaires associées à la tumeur dans la zone tumorale (ICP) est de 1 %, IC + est évalué à 0 %, < 100 % ou
100 % en raison des difficultés à estimer le pourcentage de coloration dans de petits volumes de cellules immunitaires en faible concentration.
La faible quantité de coloration de la PD-L1 observée dans les cas avec < 100 % IC + doit être considérée comme une expression de la PD-L1
< 25 %. Veuillez vous reporter au tableau 4.
L’interprétation des cas de carcinome urothélial colorés avec le test doit se base sur les critères mentionnés dans le tableau ci-après. Des
images de profils de coloration à niveaux d’expression variés sont fournies dans les sections qui suivent. Veuillez vous reporter au tableau 4.
Tableau 4 : Algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour le carcinome urothélial
Interprétation de la PD-L1
Description de la coloration
L’état de la PD-L1 est déterminé par le pourcentage de cellules tumorales présentant toute coloration membranaire au-delà de la coloration de fond ou par le
pourcentage de cellules immunitaires associées à la tumeur présentant une coloration (IC +), quelle que soit l’intensité au-delà de la coloration de fond. Le
pourcentage de la zone tumorale occupé par les cellules immunitaires associées à la tumeur (ICP) est utilisé pour déterminer IC +, c’est-à-dire le pourcentage de
la zone d’ICP présentant une coloration des cellules immunitaires positive à la PD-L1.
Élevé
L’état de la PD-L1 est considéré comme élevé si l’un des critères suivants est rempli :
•
≥ 25 % des cellules tumorales présentent une coloration membranaire ; ou,
•
ICP > 1 % et IC + ≥ 25 % ; ou,
•
ICP = 1 % et IC + = 100 %.
Faible/négatif
L’état de la PD-L1 est considéré comme faible/négatif si :
•
aucun des critères indiquant un état élevé de la PD-L1 n’est rempli.
ÉTAT FAIBLE/NÉGATIF DE LA PD-L1 : EXPRESSION DES CELLULES TUMORALES < 25 %
0%
12
5%
10 %
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
ÉTAT ÉLEVÉ DE LA PD-L1 : EXPRESSION DES CELLULES TUMORALES ≥ 25 %
25 %
50 %
100 %
ÉTAT FAIBLE/NÉGATIF DE LA PD-L1 : EXPRESSION DES CELLULES IMMUNITAIRES ASSOCIÉES À LA TUMEUR < 25 %
0 % IC +
10 % IC +
20 % IC +
ÉTAT ÉLEVÉ DE LA PD-L1 : EXPRESSION DES CELLULES IMMUNITAIRES ASSOCIÉES À LA TUMEUR ≥ 25 %
30 % IC +
60 % IC +
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
80 % IC +
13
Présentation de l’algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour le carcinome urothélial
1.
La lame H&E est examinée pour détecter une tumeur viable, les
cellules immunitaires associées à la tumeur et la zone tumorale.
a.La zone tumorale englobe le stroma desmoplastique et
les cellules immunitaires, propres et associés à la tumeur,
infiltrant la tumeur et contenues dans la desmoplasie.
2.
Visuellement, les cellules immunitaires associées à la tumeur
sont densément agrégées (sans stroma intervenant) dans la zone
tumorale lors de l’estimation des cellules immunitaires présentes
(ICP).
a.Les cellules immunitaires associées à la tumeur incluent
celles présentes dans le stroma réactif tumoral, entre les
îlots tumoraux et celles qui envahissent la tumeur en ellemême.
3.
Le pourcentage d’ICP est noté en matière de 0 %, 1 %, 5 %, et en
déciles et quartiles (10, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 75, 80, 90, 100).
a.
Si un pourcentage brut tombe entre un décile ou un quartile,
l’arrondi mathématique habituel est utilisé pour noter le
décile ou le quartile le plus proche.
b.Pour faire la différence entre 1 % et 5 % d’ICP, une
estimation brute en pourcentage de 2 % est arrondie à 1 %
et une estimation de 3 % à 4 % est arrondie à 5 %.
4.
La lame colorée par PD-L1 est examinée pour détecter la
coloration de cellules tumorales et de cellules immunitaires.
5.
Estimation du pourcentage de cellules tumorales présentant une
coloration membranaire partielle ou totale, à n’importe quelle
intensité.
6.
Le pourcentage de cellules immunitaires (au sein des ICP)
exprimant la PD-L1 (IC +) est estimé.
a.
Les cellules immunitaires présentant la moindre coloration
(membranaire, cytoplasmique, ou punctiforme), à n’importe
quelle intensité, sont regroupées visuellement au sein des
ICP pour estimer l’IC +.
b.L’IC + est noté en déciles et en quartiles (0, 10, 20, 25, 30, 40,
50, 60, 70, 75, 80, 90, 100).
7.
14
Pour les cas avec une valeur d’ICP de 1 %, le pourcentage estimé
pour IC + est indiqué comme étant égal à 0 %, < 100 % ou 100 %.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Présentation de l’algorithme d’évaluation VENTANA PD-L1 (SP263) Assay
pour le carcinome urothélial
Évaluer H&E pour détecter
une tumeur viable et la zone
tumorale (rouge). Examiner la
zone tumorale à la recherche
de cellules immunitaires
(noir) à 10X et regrouper
visuellement les cellules
immunitaires à 2X ou 4X pour
déterminer le pourcentage
d’ICP.
Cellules
tumorales
Cellules
immunitaires
Examiner la lame colorée par
PD-L1 à 10X ou 20X pour
distinguer la coloration des
cellules tumorales de celle des
cellules immunitaires.
Examiner les cellules tumorales
à 10X ou 20X pour évaluer
la coloration membranaire,
quelle qu’en soit l’intensité.
Déterminer le pourcentage
de cellules tumorales avec
coloration membranaire en
examinant l’échantillon à 2X ou
4X, le cas échéant.
Examiner les cellules
immunitaires à 10X ou 20X
pour détecter toute coloration,
à n’importe quelle intensité.
Regrouper visuellement les
cellules immunitaires colorées
(bleu) à 2X ou 4X et comparer
à la valeur d’ICP pour
déterminer IC +.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
15
Évaluation de la coloration des cellules immunitaires
De nombreuses cellules immunitaires présentent une coloration avec
le test. Celles-ci comprennent les lymphocytes, les macrophages,
les histiocytes, les cellules dendritiques réticulaires, les cellules
plasmatiques et les neutrophiles. La lame colorée par H&E est
initialement examinée pour déterminer le pourcentage total de la
zone tumorale (cellules tumorales et tout stroma desmoplastique)
occupé par des cellules immunitaires sans stroma intervenant (ICP).
Les zones non considérées comme faisant partie de la zone tumorale
comprennent une tumeur non viable comme celles avec des artefacts
de cautérisation ou d’écrasement, et une nécrose importante. Les
tissus lymphoïdes normaux non envahis par le néoplasme, comme
dans le cas de ganglions lymphatiques avec une tumeur métastatique,
ne sont pas considérés comme faisant partie de la zone tumorale ou
des cellules immunitaires concernant la tumeur.
La lame PD-L1 IHC est ensuite notée par rapport au pourcentage
de cellules immunitaires associées à la tumeur colorées par PD-L1
(IC +). Les colorations membranaire, cytoplasmique et punctiforme
des cellules immunitaires par PD-L1 sont toutes incluses dans
l’estimation. Dans les cas où des cellules immunitaires à coloration
positive sont mélangées avec des cellules tumorales à coloration
positive, il peut être difficile de quantifier la coloration pour chaque
composant. Des exemples d’interprétation des cellules immunitaires
sont présentés dans les séries de photos suivantes.
Les étapes suivantes décrivent l’estimation du pourcentage de
coloration des cellules immunitaires associées à la tumeur.
Estimation du pourcentage de coloration des cellules immunitaires associées à la tumeur :
1.Examiner le cas H&E pour détecter une tumeur viable reliée à un stroma desmoplastique, contenant des cellules immunitaires
associées à la tumeur. Les cellules immunitaires associées à la tumeur comprennent celles présentes dans le stroma réactif tumoral,
entre les îlots tumoraux et celles qui envahissent la tumeur en elle-même. Les portions de tumeur situées dans les tissus lymphatiques
ne sont pas incluses dans la zone tumorale.
Évaluation des cellules immunitaires 1 : les cellules immunitaires associées à la tumeur (flèches noires) dans la zone tumorale (contour bleu) sont présentes au niveau du bord
d’attaque de la tumeur et sont incluses dans l’estimation de l’ICP. Un agrégat séparé de lymphocytes n’est pas compris dans la zone tumorale (contour noir) (4X)
16
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
2.L’examen à un grossissement inférieur est recommandé pour estimer le pourcentage de cellules immunitaires à l’intérieur de et
adjacentes à la région tumorale (ICP). Les cellules immunitaires situées à l’intérieur des vaisseaux sanguins et des tissus lymphatiques
ne sont pas prises en compte.
Évaluation des cellules immunitaires 2 : la zone tumorale contenant des cellules tumorales, du stroma desmoplastique et des cellules immunitaires associées à la tumeur est
entourée en bleu et inclut les agrégats de cellules immunitaires identifiés par des flèches noires. Des cellules immunitaires à l’extérieur de la zone tumorale sont également présentes
(contours noirs) (1X)
3.Exclure les zones non néoplasiques non atteintes par la tumeur, les zones contenant des portions de tumeur nécrosée, et celles
contenant des artefacts de cautérisation et d’écrasement.
Évaluation des cellules immunitaires 3 : la zone tumorale se compose uniquement de zones viables de tumeur et de desmoplasie (zones entourées en bleu). Tout artefact de
cautérisation, artefact d’écrasement, nécrose ou grande surface de tissus non néoplasiques ne sont pas pris en compte (3X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
17
4.Si les îlots tumoraux sont séparés par du muscle ou du stroma, ils sont inclus dans la zone tumorale si la tumeur borde ces derniers des
deux côtés dans un champ de 10X.
NON incluse dans la
zone tumorale
10X
INCLUSE dans la
zone tumorale
10X
Évaluation des cellules immunitaires 4 : les zones entourées montrent de vastes zones de stroma fibromusculaire non envahi par la tumeur. Lorsqu’il est observé à un
grossissement supérieur (10X), le stroma présentant la tumeur des deux côtés dans un seul champ de vision (bleu) est inclus dans la zone tumorale globale. Lorsque le grand
faisceau de stroma fibromusculaire n’est pas bordé par la tumeur dans un seul champ 10X (noir), il n’est pas inclus dans la zone tumorale globale. (1X)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
5.Pour le carcinome urothélial non invasif (carcinome papillaire), inclure les cellules immunitaires contenues dans les noyaux
fibrovasculaires ainsi que dans la base immédiatement adjacente de la fronde/tige.
A
B
A
B
Évaluation des cellules immunitaires 5 : la flèche à double sens (noire) montre la base de la tumeur papillaire et la zone tumorale pour ce carcinome urothélial non invasif est
entourée (bleu). Les cellules immunitaires du noyau fibrovasculaire intratumoral (A) (10X) et de la base adjacente de la tige (B) (5X) sont incluses dans l’estimation de l’ICP (0,8X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
19
6.Estimer visuellement la zone occupée par les cellules immunitaires associées à la tumeur par rapport à la zone tumorale totale
(ICP = pourcentage de zone tumorale occupé par les cellules immunitaires).
Évaluation des cellules immunitaires 6 : les régions occupées par les cellules immunitaires dans la zone tumorale dans l’image du haut (contours bleus) sont identifiées
dans l’image du bas (contours gris), puis densément agrégées (illustré par les petites zones noires) afin d’estimer le pourcentage de la zone tumorale occupé par des cellules
immunitaires, ou ICP : dans cet exemple, 10 % (ensemble des zones noires par rapport à la zone tumorale) (5X).
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Évaluation des cellules immunitaires 7 : les régions stromales occupées par des cellules immunitaires largement éparses (contours bleus) sont identifiées. Lorsque les cellules
immunitaires sont densément agrégées (représenté par la zone noire) afin d’estimer le pourcentage de la zone tumorale occupé par des cellules immunitaires, l’ICP dans cet exemple
est de 5 % (10X)
Évaluation des cellules immunitaires 8 : les infiltrats de cellules immunitaires contenant des neutrophiles et des éosinophiles sont inclus dans l’estimation de l’ICP. Dans cet
exemple, l’ICP est de 25 % (10X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
21
Évaluation des cellules immunitaires 9 : dans ce champ de vision, l’ICP pour la petite quantité de cellules immunitaires dans le coin supérieur droit est de 1 % (10X)
Évaluation des cellules immunitaires 10 : l’ICP pour ce champ de vision lorsque les cellules immunitaires sont densément agrégées est de 5 % (10X)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
7.Examiner la lame colorée par PD-L1 et évaluer le pourcentage de cellules immunitaires associées à la tumeur qui présentent une
expression de la PD-L1 (IC +), y compris les colorations cytoplasmique diffuse, membranaire linéaire et punctiforme des cellules
immunitaires.
Évaluation des cellules immunitaires 11 : les cellules immunitaires qui composent l’ICP sont entourées en bleu (image du haut) et peuvent être observées sous forme d’agrégat
dense dans l’image du bas. Les cellules immunitaires présentant une coloration par PD-L1 (IC +) sont surlignées en rouge (image du haut) et lorsqu’agrégées, elles représentent
25 % de l’ICP (image du bas) (5X). Veuillez vous référer à l’image H&E associée contenue dans ce guide, « Évaluation des cellules immunitaires 6 ».
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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8.Lors de l’évaluation des métastases au niveau des ganglions lymphatiques, le stroma réactif généré par la tumeur est inclus dans la
zone tumorale pour déterminer l’ICP. Dans les cas où la tumeur ne génère pas de réponse stromale, la zone tumorale est limitée aux
nids tumoraux et aux cellules immunitaires adjacentes en contact direct avec la tumeur uniquement. Toutes les cellules immunitaires
faisant partie du tissu lymphoïde non impliqué sont ignorées pour l’estimation de l’ICP.
Évaluation des cellules immunitaires 12 : dans cette tumeur métastatique dans un ganglion lymphatique, la zone tumorale contenant des cellules tumorales, du stroma
desmoplastique et des cellules immunitaires est entourée en bleu (4X). Un grossissement supérieur montre des cellules immunitaires incluses dans l’ICP au sein du stroma réactif
(encart A [20X]). Le long de la périphérie du nodule métastatique, seules les cellules immunitaires immédiatement adjacentes aux cellules tumorales entourées en bleu sont incluses
dans l’ICP (encart B [20X]).
9.Seul dans les cas où l’ICP est égal à 1 %, l’IC + est uniquement exprimé comme égal à 0 %, < 100 % ou 100 % en raison de la difficulté
de quantifier une si faible quantité de cellules.
10.Si la lame colorée par PD-L1 montre une coloration des cellules immunitaires supérieure à l’ICP estimé initialement à partir de la lame
H&E, se reporter à la lame H&E et réviser le pourcentage ICP, le cas échéant.
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Atlas d’expression de la PD-L1 dans le carcinome urothélial
Cas de cellules tumorales
Cas de cellule tumorale 1 : cellules tumorales avec 0 % de coloration, cellules immunitaires avec 0 % de coloration. (IC +) (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellule tumorale 2 : cellules tumorales avec 0 % de coloration, cellules immunitaires avec 80 % de coloration. (IC +) (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellule tumorale 3 : cellules tumorales avec 10 % de coloration, cellules immunitaires avec 40 % de coloration (IC +) (10X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellule tumorale 4 : cellules tumorales avec 25 % de coloration, cellules immunitaires avec 10 % de coloration (IC +) (10X)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellule tumorale 5 : cellules tumorales avec 50 % de coloration, cellules immunitaires avec 20 % de coloration (IC +) (10X)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellule tumorale 6 : cellules tumorales avec 100 % de coloration, cellules immunitaires avec 20 % de coloration. (IC +) (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellules immunitaires
Cas de cellules immunitaires 1 : cellules immunitaires avec 0 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 0 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellules immunitaires 2 : cellules immunitaires avec 10 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 80 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellules immunitaires 3 : cellules immunitaires avec 30 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 10 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
33
Cas de cellules immunitaires 4 : cellules immunitaires avec 25% de coloration (IC +), cellules tumorales avec 100% de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellules immunitaires 5 : cellules immunitaires avec 40 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 10 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellules immunitaires 6 : cellules immunitaires avec 50 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 100 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas de cellules immunitaires 7 : cellules immunitaires avec 60 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 0 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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Cas de cellules immunitaires 8 : cellules immunitaires avec 90 % de coloration (IC +), cellules tumorales avec 100 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 20X.
Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficiles
Une note de PD-L1 est attribuée aux cas en fonction du pourcentage
de cellules tumorales présentant une coloration membranaire et
de cellules immunitaires associées à la tumeur. Divers profils de
coloration et caractéristiques morphologiques peuvent rendre
difficiles l’interprétation et la quantification de la coloration
membranaire de la tumeur.
Certains cas peuvent être particulièrement compliqués en raison des
facteurs suivants :
• Faible coloration membranaire des cellules tumorales par
opposition à faible coloration cytoplasmique des cellules
tumorales
Certains échantillons peuvent présenter une faible coloration
cytoplasmique des cellules tumorales qui peut être confondue, à
faible grossissement, avec une faible coloration membranaire des
cellules tumorales. Pour cette raison, lors de l’évaluation des lames
colorées par PD-L1 IHC, une coloration faible doit être confirmée
par l’examen à un grossissement supérieur afin de distinguer la
coloration membranaire de la coloration cytoplasmique dans les
cellules tumorales.
• Chevauchement d’une forte coloration des cellules
immunitaires et de la coloration des cellules tumorales
Certaines tumeurs peuvent contenir un élément hautement
inflammatoire à la fois autour de la tumeur et infiltrant celle-ci.
Dans certains cas, lorsqu’une coloration forte est observée à la
fois pour les cellules tumorales et les cellules immunitaires, il peut
s’avérer difficile de différencier et de quantifier la coloration par
PD-L1 IHC pour ces deux populations de cellules. La présence de
cellules immunitaires infiltrant la tumeur doit être confirmée à l’aide
d’une lame H&E. Le profil de coloration par PD-L1 ainsi que les
caractéristiques nucléaires des cellules sont utilisés pour attribuer
une expression aux cellules immunitaires (coloration punctiforme,
petit noyau uniforme) et aux cellules tumorales (coloration
membranaire linéaire, grand noyau irrégulier).
• Cas avec de multiples fragments de tissus
Les échantillons de carcinome urothélial résultant de résections
transurétrales de la vessie (RTUV) peuvent se traduire par des
cas difficiles, compliqués par de multiples fragments de tissu
dispersés sur la lame avec des quantités variables de nécrose,
d’artefacts de cautérisation/d’écrasement, ou de cellules
tumorales ou immunitaires associées à la tumeur viables. Une
approche d’examen fragment par fragment avec des estimations
du pourcentage de coloration individuelle suivies d’une moyenne
globale peut faciliter l’évaluation.
• Matériel endogène gênant
La présence de matériel endogène, tel qu’un pigment mélanique ou
de l’hémosidérine, dans des échantillons de carcinome urothélial
peut parfois obscurcir et gêner l’interprétation de la coloration par
PD-L1 IHC des cellules tumorales et immunitaires. La comparaison
de la lame de contrôle isotype négatif avec la lame colorée PD-L1
peut permettre de différencier la coloration des biomarqueurs du
matériel endogène. Une coloration non spécifique peut également
être observée sur la lame colorée PD-L1 dans des zones de
nécrose.
Quelques exemples de cas difficiles sont illustrés dans les pages
suivantes.
• État limite de la PD-L1 (SP263)
Certains cas sont près du seuil de coupe entre un état élevé et
faible/négatif de la PD-L1. Pour ces cas, il est particulièrement
difficile d’estimer le pourcentage de cellules ciblées présentant une
coloration. Il peut donc être utile d’examiner ces cas limites avec
une amplification permettant d’évaluer l’intégralité de la tumeur. Il
peut également être utile de consulter un collègue qualifié.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
39
Cas difficiles : faible coloration membranaire des cellules tumorales par rapport à faible coloration cytoplasmique
Cas difficile 1 : la zone entourée en bleu (image 10X de la PD-L1, en haut à droite) contient une faible coloration des cellules tumorales qui est difficile à distinguer. L’examen à un
grossissement supérieur (20X) montre qu’il y a une faible coloration membranaire des cellules tumorales éparses. Pour l’image à 10X : cellules tumorales avec 40 % de coloration,
cellules immunitaires avec 80 % de coloration. (IC +) (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 10X. Rangée inférieure PD-L1 20X.)
40
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficile 2 : les cellules tumorales à coloration membranaire modérée ou supérieure sont facilement identifiées dans la moitié droite de ce champ. L’examen minutieux de la
tumeur met en évidence des cellules avec une faible expression membranaire (contours bleus) qui devraient également être comptabilisées lors du calcul du pourcentage total de
coloration membranaire.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
41
Cas difficiles : chevauchement d’une forte coloration des cellules immunitaires et de la coloration des cellules
tumorales
Cas difficile 3 : CT et CI se mélangent, car les deux expriment la PD-L1. Dans les zones à forte coloration des CT, les CI ne peuvent être évaluées que lorsque l’on peut distinguer
leur coloration de celle des cellules tumorales. Les différents profils de coloration des CI (profil punctiforme) ainsi que la morphologie nucléaire peuvent être utilisés pour identifier
l’expression de la PD-L1. Les contours bleus contiennent des zones avec une coloration des cellules immunitaires perceptible et la zone entourée de vert présente une coloration
punctiforme des cellules immunitaires éparses. Cellules tumorales avec 100 % de coloration, cellules immunitaires avec 25 % de coloration (IC +) (Rangée supérieure H&E 10X,
PD‑L1 10X. Rangée inférieure PD-L1 20X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficile 4 : CT et CI mélangées, avec une coloration membranaire des CT plus distincte et des CI difficiles à évaluer et ne pouvant être évaluées que le long de la périphérie de la
tumeur. Cellules tumorales avec 100 % de coloration. (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 10X. Rangée inférieure PD-L1 20X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
43
Cas difficiles : cas avec de multiples fragments de tissus
Cas difficile 5 : échantillon RTUV contenant plusieurs éléments avec artefact d’écrasement, caillot de sang et nécrose qui présente une coloration non spécifique sur la lame HIC (1X).
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficiles : état limite de la PD-L1
Cas difficile 6 : faible coloration des cellules tumorales observée à un grossissement de 10X, difficulté à distinguer la coloration membranaire de la coloration cytoplasmique.
L’examen au grossissement supérieur (20X) met en évidence des cellules tumorales avec 20 % de coloration membraneuse faible et claire.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
45
Cas difficile 7 : expression limite de la PD-L1 des CT avec 25 % de coloration membranaire des cellules tumorales (10X)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficile 8 : expression limite de la PD-L1 des CI avec un IC + de 20 % (20X). (Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 10X. Rangée inférieure PD-L1 20X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
47
Cas difficiles : Matériel endogène gênant
Cas difficile 9 : le cas contient du pigment anthracosique (flèche rouge) qui chevauche la coloration punctiforme des cellules immunitaires (flèche bleue) ainsi que la coloration
membranaire des cellules tumorales (flèche noire) (20X). (Rangée supérieure H&E 10X, Rb Nég. 10X.) Rangée inférieure PD-L1 10X.)
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Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Cas difficile 10 : les grandes zones de nécrose peuvent avoir une coloration DAB non spécifique qui peut être confondue avec la coloration des cellules immunitaires.
(Rangée supérieure H&E 10X, PD-L1 10X. Rangée inférieure PD-L1 20X.)
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
49
Répercussion des conditions préanalytiques sur la coloration par le test VENTANA PD-L1
(SP263) Assay
Recommandations de fixation pour obtenir des résultats de coloration optimaux avec le test VENTANA PD-L1
(SP263) Assay
Ventana recommande d’effectuer la fixation pendant 6 à 72 heures dans du NBF à 10 %. Les fixateurs acceptables et les temps de fixation sont
encadrés en bleu.
Coloration du tissu placentaire par le test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay selon les fixateurs et les temps de fixation
Fixateur
Point de
mesure
(h)
NBF à 10 %
Formol zinc
Fixateur PREFER**
AFA**
Formol alcool**
Éthanol à 95 %**
1*
6
12
24
48
72
REMARQUES
*Un temps de fixation d’une heure n’est pas recommandé pour tous
les types de fixateurs
**L’utilisation du fixateur PREFER et d’éthanol à 95 % (coloration
plus faible) ou de fixateurs à base d’alcool (coloration de fond
élevée) n’est pas recommandée. Voir les images supplémentaires à
un grossissement supérieur sur la droite.
50
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
Influence de l’épaisseur des tissus sur la coloration par
le test
Références
Ventana recommande une épaisseur de tissu de 4-5 microns pour
une utilisation avec le test.
1.
Chalasani V, Chin JL, Izawa JI. Histologic variants of urothelial
bladder cancer and nonurothelial histology in bladder cancer.
Can Urol Assoc J. 2009;3(6 Suppl 4):S193-198.
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Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M, et al. GLOBOCAN 2012 v1.0.
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infections and tumor evasion. Cancer Immunol Immunother.
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urothelial bladder cancer. J Clin Oncol. 2016; 34(26):3119-25.
Stabilité des lames
Des coupes d’environ 4-5 microns d’épaisseur doivent être prélevées
et montées sur des lames de verre chargées positivement. Les lames
doivent être colorées dans les six mois suivant la coupe.
10. Patel SP, Kurzrock R. PD-L1 Expression as a Predictive Biomarker
in Cancer Immunotherapy. Mol Cancer Ther. 2015;14(4) 847-856.
Guide d’interprétation du test VENTANA PD-L1 (SP263) Assay pour la coloration du carcinome urothélial
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