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Leica MacroFluo™ Le macroscope à fluorescence – La précision de l'image globale jusque dans les moindres détails Living up to Life Sur les traces de la nature Les techniques de fluorescence jouent un rôle déterminant pour la recherche fonctionnelle d'organismes dans les domaines de la biologie moléculaire, cellulaire et du développement. En outre, elles mettent à disposition des chercheurs un potentiel énorme en leur offrant un aperçu sur un monde auquel l'œil humain n'a pas accès normalement. Des études génétiques et des examens cellulaires d'envergure réalisés sur des organismes modèles appropriés constituent, par là même, la condition de base pour la compréhension des principes moléculaires et des rapports complexes de la vie. Le développement, la biologie cellulaire et la physiologie de la souris sont, à bien des égards, très similaires à ceux de l'être humain. C'est pourquoi la souris est un modèle biologique idéal qui permet d'en tirer des conséquences pour l'homme, d'expliquer les causes des maladies et de développer de nouvelles approches thérapeutiques. Parce que la biologie cellulaire et de développement s'oriente de plus en plus vers la compréhension des rapports complexes dans l'organisme, elle requiert un système microscopique flexible qui permette d'examiner et de capturer numériquement les origines de maladies sur des modèles animaux vivants avec une très grande précision et une très haute résolution dans un champ d'image doté d'une fluorescence intense. Le concept MacroFluo™ de Leica associe les avantages de la macroscopie (grands champs d'objet, grandes distances de travail, reproduction précise et sans parallaxe) à la technique de fluorescence à une résolution élevée. Le MacroFluo™ de Leica vous donne accès à des images brillantes d'une précision de reproduction très élevée et d'une richesse informationnelle exceptionnelle sur une large plage de grossissement afin de capturer toutes les facettes de l'image globale. ➊ Embryon de poisson zèbre. Expression de la GFP sous contrôle des séquences "Sonic Hedgehog" de régulation des gènes. Expression de la GFP sur la plaque du plancher antérieure et dans la notochorde. Pr. Dr. Uwe Straehle, Centre de recherche de Karlsruhe et Cédric Vonesch, Imaging Centre de l’IGBMC, Illkirch, France ➋ – ➐ Expression de fluorescence verte dans une souris transgénique EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein : protéine fluorescente verte modifiée), Dr. Massimo Pasqualetti, Università di Pisa et Dr. Filippo Rijli, Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France Nous tenons à remercier particulièrement Jean-Luc Vonesch et Didier Hentsch de l'Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire (IGBMC), Illkirch, France pour leur étroite collaboration dans le cadre du développement du MacroFluo™ de Leica 2 ➊ ➋ ➌ ➍ ➎ ➏ ➐ 3 Quand excellence et brillance vont de pair Documentation sans parallaxe • Représentation précise des préparations macroscopiques, de l'image globale jusque dans le moindre détail • Analyse exacte des détails et représentation 3D Du macro au micro • Systèmes de zoom manuels ou motorisés 6:1 et 16:1 à correction apochromatique pour une d'adaptation optimale • Zoom 6:1 à grande ouverture numérique pour un rendement lumineux optimal • Zoom 16:1 permettant de couvrir un large spectre d'application avec un seul instrument • Représentation optimale de vos échantillons grâce au large choix d'objectifs de haute qualité 4 De construction modulaire, le système MacroFluo™ de Leica permet une adaptation individuelle aux tâches à exécuter pour une représentation précise de toutes les facettes de la préparation macroscopique. Macroscopie en fluorescence sans parallaxe Tandis qu'en stéréomicroscopie, du fait d'un changement de la position z de l'observateur, une erreur de parallaxe, c.-à-d. un décalage latéral de l'objet, est associée à la prise de vue des piles Z, le MacroFluo™ de Leica associe l'observation macroscopique à un trajet optique vertical caractéristique pour les microscopes. Ceci permet d'obtenir des reproductions sans parallaxe tout en ayant de grandes distances de travail et de grands champs d'objet, et ce avec une précision maximale. Les résultats obtenus lors du traitement numérique et de l'analyse des images et lors des mesures sont bien plus précis. MacroFluo™ Z6 APO (A) de Leica : résolution macro élevée et fluorescence puissante Le Z6 APO (A) de Leica est disponible en tant que zoom 6.3:1, manuel ou motorisé, à correction entièrement apochromatique qui, selon les possibilités offertes par l'objectif, peut atteindre une résolution macro de 351 lp/mm (Planapo 1×) à 1500 lp / mm (Planapo 5× HR) et ainsi traiter des échantillons d'une largeur de structure max. de 330 nm. La large gamme d'objectifs à correction planapochromatique garantit un espace suffisant pour la manipulation des échantillons et permet, grâce à la grande ouverture numérique, de réaliser une documentation performante d'échantillons fluorescents à un faible grossissement. La motorisation du zoom, du diaphragme iris et de la mise au point fine intégrée ainsi que la nouvelle mise au point motorisée facilitent l'automatisation des procédures de tests. Les résultats peuvent être reproduits à tout moment. MacroFluo™ Z16 APO (A) de Leica : analyses de fluorescence au plus haut niveau Le Z16 APO (A) de Leica est également disponible en tant qu'instrument manuel ou motorisé. Avec une plage de zoom de 7.1× à 115× (Planapo 1×), il est possible d'observer et de documenter des échantillons fluorescents d'une largeur de structure max. de 330 nm (Planapo 5× HR). Le Z16 APO (A) permet par exemple d'examiner des embryons de poules et des systèmes nerveux aux contours nets mais aussi de réaliser avec précision le suivi de détails sélectionnés tels que l'expression de protéines, avec un grossissement et une résolution élevés. 5 Images fluorescentes brillantes, riches en détails et en contrastes • Couplage directe de l'éclairage et du zoom optique : rendement lumineux maximal et éclairage homogène des champs d'objet • Filtres adaptés à vos échantillons : flexibilité maximale concernant la sélection de colorants fluorescents • Propriétés de transmission optimisées en fonction des échantillons et filtres avec Zero-Pixel-Shift : pour des images extrêmement nettes Sources de lumière sans ajustage : vos échantillons sous leur meilleur jour • Leica EL6000 : Éclairage homogène des champs d'objet avec commande logicielle de l'obturateur pour la documentation de séries d'images • Leica SFL100 : Éclairage à LED compact, à durée de vie élevée et bon marché avec réglage de l'intensité lumineuse pour une qualité d'image optimale • Leica SFL4000 : 5 modules LED librement combinables pour l'excitation spécifique de fluorochromes : efficacité lumineuse élevée pour des images riches en contrastes et une réduction de la phototoxicité Puissant même avec une faible fluorescence La fluorescence sans compromis Le MacroFluo™ de Leica est équipé d'un axe de fluorescence de haute qualité garantissant un flux lumineux optimal et ainsi une luminosité et une homogénéité maximales. La tourelle rotative peut recevoir jusqu'à cinq blocs de filtres. L’éclairage est couplé à l’optique du zoom. Cela garantit à chaque position de zoom une conduction exacte de la lumière, un rendement lumineux maximal et des champs d'objet homogènes. Filtrez le meilleur de vos échantillons Les nouveaux colorants fluorescents et les nouvelles méthodes de coloration ouvrent toujours des perspectives entièrement nouvelles pour l'explication des étapes du développement, des réactions, des transferts de signaux ou des voies métaboliques. À cet effet, la large gamme de blocs de filtres Leica peut être complétée par des blocs de filtres combinés individuellement, afin de garantir des propriétés de transmission optimales pour toutes les applications. Lors de la commutation des blocs de filtres, aucun décalage de pixels ne se produit entre les images individuelles des diverses plages spectrales, et ce grâce à la technologie Zero-Pixel-Shift : une condition idéale pour les expériences numériques en fluorescence multicolore. Que la lumière soit Avec le dispositif EL6000 de Leica, Leica Microsystems propose une source de lumière externe équipée d'une lampe aux halogénures longue durée : une solution alternative bon marché et permettant de gagner du temps par rapport à la lampe à vapeur de mercure. Par ailleurs, le SFL100 de Leica permet d'utiliser un éclairage fluorescent à LED compact et bon marché fournissant une excitation optimale à 470 nm avec une intensité lumineuse réglable. Pour combiner aisément différentes longueurs d'ondes lors d'expériences à fluorescence multiple, le SFL4000 de Leica propose cinq modules à fluorescence performants commandés par une interface utilisateur intuitive. Toutes les sources de lumière mentionnées ici permettent une adaptation sans ajustement au microscope et garantissent ainsi des images fluorescentes riches en contrastes et bénéficiant d'un éclairage homogène : vos recherches apparaissent sous leur meilleur jour. ➊ – ➌ Expression de la GFP dans l'aile d'une poule. Institut Albert Bonniot, Grenoble, France ➍ Souris transgénique avec expression de la GFP. Dr. Daniel Metzger, Pr. Pierre Chambon, Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France ➎ – ➏ Poisson zèbre. Représentation du contraste par polarisation en fausse couleur. Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France ➐ 6 Poisson zèbre, larve. Expression de la GFP CD41 dans les thrombocytes. Prise de vue avec chronorupteur de la circulation des thrombocytes pour la représentation du système vasculaire. Dr. Philippe Herbomel, Institut Pasteur, Paris, France ➊ ➍ ➋ ➌ ➎ ➏ 7 Équipé pour les travaux futurs Des bases solides pour vos recherches Une documentation exigeante, en particulier pour les détails les plus fins, requiert des bases solides. La structure de la nouvelle colonne de mise au point, extrêmement robuste d'un point de vue mécanique, ainsi que le support de l'axe de fluorescence absorbent de façon sûre les chocs et les vibrations de sorte que vous ne constaterez aucune dégradation de la qualité de l'image, même lors d'examens microscopiques d'échantillons en milieu liquide. Mise au point motorisée et SmartTouch : mise au point sûre et précise permettant de reproduire les résultats à 100 % grâce au pilotage du logiciel LAS ™ Coulisseau d'objectif (ici avec objectif 2× et 5×) : élargissement confortable du domaine d'application grâce à la commutation aisée entre les grossissements requis Tube photo binoculaire avec redressement de l'image : manipulation aisée et réglage sûr de la section d'image pour la documentation 8 La mécanique de haute qualité de la commande de mise au point rapide/fine permet de réaliser une mise au point régulière en tout confort et garantit, à tout moment, un réglage exact de la mise au point, même sur la plage des micromètres. Grâce à la nouvelle mise au point motorisée de Leica, vous pouvez non seulement réaliser une mise au point rapide et précise sur vos échantillons, mais vous pouvez également en reproduire les résultats. La documentation précise et sans parallaxe des séries Z devient un véritable jeu d'enfants avec la mise au point motorisée. Performance maximale pour vos recherches Avec la large gamme d'objectifs à correction planapochromatique et la possibilité d'adaptation d'objectifs DM, le MacroFluo™ de Leica offre une flexibilité extraordinaire en termes de grossissement et de distance de travail. L'objectif Planapo 5× extrêmement puissant offre, pour une ouverture numérique de 0.5 et une résolution de 1500 lp/mm, un rendu exact et brillant de vos résultats de recherches. Le coulisseau d'objectif pour zooms manuels permet de combiner les objectifs planapo de 2× et 5× pour un élargissement confortable du domaine d'applications. Du grossissement faible jusqu'au moindre détail : le MacroFluo™ de Leica offre des lentilles convergentes puissantes pour les examens à fluorescence rayonnante tout en octroyant suffisamment d'espace pour la manipulation d'échantillons. La base d'une documentation réussie Leica Microsystems propose un large choix de socles de diascopie puissants qui font apparaître vos échantillons sous leur meilleur jour avec l'éclairage en fond clair, à un degré de diffusion faible ou élevé, l'éclairage diascopique oblique et le fond noir. Le procédé de contraste de relief Rottermann assure, en outre, une excellente représentation, y compris des cellules vivantes, non colorées. La platine à glissement (en option) sert à positionner les échantillons avec délicatesse. De plus, l'intégration de la platine motorisée IsoPro™ de Leica permet une exécution précise des expériences à positions multiples jusqu'au balayage mosaïque (TileScan), y compris de grands échantillons. Le système de thermocontrôle Leica MATS avec platine porte-objets chauffante en verre optique fournit une température absolument stable et propice à la préservation des cellules sur toute la surface de travail. La température stable sur une longue période permet de réaliser avec exactitude des expériences dans le temps sur des échantillons sensibles à la température. Investissement pour l'avenir La faculté d'adaptation est un critère essentiel dans les environnements multi-utilisateurs afin de satisfaire aux exigences des divers domaines de recherche. Sur ce point précisément, un système Leica MacroFluo™ est un investissement rentable à long terme. Grâce à la construction modulaire, vous disposez d'une gamme d'accessoires complète pour les systèmes de zoom manuels et motorisés. Socles Leica TL : de la diascopie simple à l'éclairage oblique en passant par le contraste de relief, avec les socles Leica, tirez le meilleur de vos échantillons Avec la platine motorisée à mouvements croisés IsoPro™, le balayage automatique des échantillons devient un véritable jeu d'enfants Leica SmartTouch™ : aperçu et commande aisée des fonctions microscopiques motorisées via le panneau tactile et les boutons de commandes à réglage individuel 9 Solutions complètes adaptées aux besoins personnels Solution complète intégrée Dans le logiciel Leica Application Suite (LAS), les microscopes automatiques, caméras numériques et logiciels sont combinés dans une solution d'imagerie conviviale et cohérente. La polyvalence et la structure modulaire appropriée garantissent la flexibilité de l'assemblage d'un système microscopique assorti de façon optimale à vos applications. La solution logicielle LAS offre une solution intuitive facilitant aussi bien les travaux de routine que les analyses de recherche. Leica MM AF Leica MM AF powered by MetaMorph® est disponible en version en ligne MM AF pour le traitement et l'analyse des images et en tant que progiciel complet pour l'acquisition d'images et l'analyse. Ce dernier offre une flexibilité et une polyvalence maximales en termes d'intégration du microscope, des périphériques et de la caméra pour les acquisitions, le traitement et l'analyse d'images multidimensionnelles. Les modules optionnels tels que la Déconvolution 3D ou les Mesures 3D ainsi que divers modules d'application pour l'analyse de fluorescence automatique permettent d'adapter le système microscopique aux exigences de vos travaux de recherche. Captures d'écran de Leica LAS et MM AF powered by Metamorph® (de haut en bas) : Module Multifocus LAS : Drosophila melanogaster. Œil à facettes. Dr. Tricoire, Institut Jacques Monod, Université de Paris, France Analyse 3D du mouvement MM AF de Leica : Trajectoires de cinq particules identifiées. Pr. Marianne Quiding-Järbrink, Department of Microbiology and Immunology, The Sahlgrenska Academy, University of Gothenburg, Suède Analyse 3D du mouvement MM AF de Leica : Représentation graphique de l'analyse 10 Le spécialiste des applications de fluorescence Avec le AF6000 de Leica, c'est un logiciel de fluorescence d'une ergonomie exceptionnelle que Leica Microsystems a développé en collaboration avec des scientifiques. Le concept de manipulation intuitif vous permet d'accéder facilement et en toute fiabilité à des résultats brillants. Combiné aux modules de zoom motorisés du MacroFluo™, le logiciel AF6000 E de Leica pour débutants permet de réaliser aisément la documentation, la superposition d'images "time-lapse". La structure modulaire du logiciel permet ainsi à tout moment de compléter votre système en fonction de vos besoins. Ainsi le AF6000 de Leica satisfait à d'autres applications de fluorescence : la commande de l'obturateur EL6000 permet de combiner la fluorescence multicanal manuelle avec les séries chronologiques et les séries Z. L'intégration de la platine motorisée à mouvements croisés IsoPro™ de Leica permet de réaliser des expériences multi-positions et un balayage mosaïque ainsi que l'acquisition WellPlate en option. Une multitude de fonctions destinées à la documentation des images, la quantification, l'optimisation et l'analyse peuvent être complétées par des options logicielles telles que la reconstruction 3D d'informations sur les images ou la Déconvolution. Le MacroFluo™ fait partie d'un système microscopique intégré qui est en mesure d'évoluer avec les exigences de vos travaux de recherche. Captures d'écran du logiciel AF6000 de Leica (de haut en bas) AF6000 : Galerie d'images en mode acquisition AF6000 : Balayage mosaïque en mode configuration AF6000 : Module d'acquisition WellPlate en mode configuration 11 Leica Microsystems opère à l’échelle globale en quatre divisions qui occupent une position de tout premier plan dans leur segment respectif. • Life Science Division La division Sciences de la Vie répond aux besoins d’imagerie des scientifiques par une très grande capacité d’innovation et un savoir-faire technique reconnu dans le domaine de la visualisation, la mesure et l’analyse des microstructures. De part sa connaissance approfondie des applications biologiques, la division fait bénéficier ses clients d’une avance scientifique décisive. • Industry Division En proposant des systèmes d’imagerie innovants et de qualité pour l’observation, la mesure et l’analyse des microstructures, la division Industrie de Leica Microsystems accompagne ses clients dans leur recherche de qualité et de résultats optimaux. Ses solutions sont utilisées aussi bien pour des tâches de routine ou de recherche, qu’en science des matériaux, en contrôle-qualité, en criminalistique et pour l’éducation. • Biosystems Division La division Biosystèmes de Leica Microsystems offre aux laboratoires et instituts de recherche spécialisés en histopathologie une gamme complète de produits performants. Il y a ainsi pour chaque tâche spécifique en histologie le produit adéquat – pour le patient comme pour le pathologiste. Des solutions de gestion électronique de processus d’une productivité élevée sont disponibles pour tout l’environnement du laboratoire. En offrant des systèmes d’histologie complets reposant sur une automatisation innovante et pourvus des réactifs Novocastra™, la division Biosystèmes favorise un excellent suivi des patients grâce à des capacités de traitement rapides, des diagnostics fiables et une collaboration étroite avec ses clients. • Surgical Division La division Chirurgie accompagne les microchirurgiens dans leur suivi des patients. Elle est un partenaire innovant qui met à la disposition des chirurgiens des microscopes chirurgicaux de grande qualité répondant à leurs besoins actuels et futurs. www.leica-microsystems.com www.leica-microsystems.com La force d’innovation de Leica Microsystems est fondée depuis toujours sur une fructueuse collaboration « avec l’utilisateur, pour l’utilisateur ». Sur cette base, nous avons développé nos cinq valeurs d’entreprise : Pioneering, High-end Quality, Team Spirit, Dedication to Science et Continuous Improvement. Vivre pleinement ces valeurs signifie pour nous : Living up to Life. Active mondialement Allemagne : Wetzlar Angleterre : Milton Keynes Tél. +44 1908 246 246 Fax +44 1908 609 992 Australie : North Ryde Tél. +61 2 8870 3500 Fax +61 2 9878 1055 Autriche : Vienne Tél. +43 1 486 80 50 0 Fax +43 1 486 80 50 30 Belgique : Groot Bijgaarden Tel. +32 2 790 98 50 Fax +32 2 790 98 68 Canada : Richmond Hill/Ontario Tél. +1 905 762 2000 Fax +1 905 762 8937 Corée : Séoul Tél. +82 2 514 65 43 Fax +82 2 514 65 48 Danemark : Ballerup Tél. +45 4454 0101 Fax +45 4454 0111 Espagne : Barcelone Tél. +34 93 494 95 30 Fax +34 93 494 95 32 Etats-Unis : Bannockburn/Illinois Tél. +1 847 405 0123 Fax +1 847 405 0164 France : Nanterre Cedex Tél. +33 811 000 664 Fax +33 1 56 05 23 23 Italie : Milan Tél. +39 02 574 861 Fax +39 02 574 03392 Japon : Tokyo Tél. +81 3 5421 2800 Fax +81 3 5421 2896 Pays-Bas : Rijswijk Tél. +31 70 4132 100 Fax +31 70 4132 109 Portugal : Lisbonne Tél. +351 21 388 9112 Fax +351 21 385 4668 Rép. populaire de Chine : Hong-Kong Tél. +852 2564 6699 Fax +852 2564 4163 Singapour Tél. +49 64 41 29 40 00 Fax +49 64 41 29 41 55 Tél. +65 6779 7823 Fax +65 6773 0628 Suède : Kista Tél. +46 8 625 45 45 Fax +46 8 625 45 10 Suisse : Heerbrugg Tél. +41 71 726 34 34 Fax +41 71 726 34 44 et des agences dans plus de 100 pays Comme l’atteste le certificat ISO 9001, Leica Microsystems (Suisse) SA, Industry Division, dispose d’un système de gestion conforme aux exigences de la norme internationale de gestion de la qualité. La production satisfait en outre aux exigences de la norme internationale ISO 14001 pour la gestion de l’environnement. Numéro de commande: Français ??? ??? • ??/10/???/???? LEICA and the Leica Logo are registered trademarks of Leica Microsystems IR GmbH. « Avec l’utilisateur, pour l’utilisateur » – Leica Microsystems 10 M1-000-0fr Leica Microsystems (Suisse) • CH-9435 Heerbrugg, 2009 • Imprimé Suisse – IV.2009 – RDV – Les illustrations, descriptions données techniques sont sans engagement notre part peuvent être modifiées sans préavis. 10LSZ10010FR • ©• © Leica Microsystems (Suisse) SASA • CH-9435 Heerbrugg, 2010 • Imprimé enen Suisse – III.2010 – RDV – Les illustrations, descriptions et et données techniques sont sans engagement dede notre part et et peuvent être modifiées sans préavis. GA und Prospekt SM fr_farbig 04.01.2010