Leica MACROFLUO Manuel utilisateur

Leica MacroFluo™
Le macroscope à fluorescence –
La précision de l'image globale jusque dans les moindres détails
Living up to Life
Sur les traces de la nature
Les techniques de fluorescence jouent un rôle déterminant pour la recherche fonctionnelle
d'organismes dans les domaines de la biologie moléculaire, cellulaire et du développement. En
outre, elles mettent à disposition des chercheurs un potentiel énorme en leur offrant un aperçu
sur un monde auquel l'œil humain n'a pas accès normalement. Des études génétiques et des
examens cellulaires d'envergure réalisés sur des organismes modèles appropriés constituent,
par là même, la condition de base pour la compréhension des principes moléculaires et des
rapports complexes de la vie.
Le développement, la biologie cellulaire et la physiologie de la souris sont, à bien des égards,
très similaires à ceux de l'être humain. C'est pourquoi la souris est un modèle biologique idéal
qui permet d'en tirer des conséquences pour l'homme, d'expliquer les causes des maladies et
de développer de nouvelles approches thérapeutiques. Parce que la biologie cellulaire et de
développement s'oriente de plus en plus vers la compréhension des rapports complexes dans
l'organisme, elle requiert un système microscopique flexible qui permette d'examiner et de
capturer numériquement les origines de maladies sur des modèles animaux vivants avec une
très grande précision et une très haute résolution dans un champ d'image doté d'une fluorescence intense.
Le concept MacroFluo™ de Leica associe les avantages de la macroscopie (grands champs
d'objet, grandes distances de travail, reproduction précise et sans parallaxe) à la technique
de fluorescence à une résolution élevée. Le MacroFluo™ de Leica vous donne accès à des
images brillantes d'une précision de reproduction très élevée et d'une richesse informationnelle exceptionnelle sur une large plage de grossissement afin de capturer toutes les facettes
de l'image globale.
➊
Embryon de poisson zèbre. Expression de la GFP sous contrôle des
séquences "Sonic Hedgehog" de régulation des gènes. Expression de
la GFP sur la plaque du plancher antérieure et dans la notochorde.
Pr. Dr. Uwe Straehle, Centre de recherche de Karlsruhe et Cédric
Vonesch, Imaging Centre de l’IGBMC, Illkirch, France
➋ – ➐ Expression de fluorescence verte dans une souris transgénique
EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein : protéine fluorescente
verte modifiée), Dr. Massimo Pasqualetti, Università di Pisa et
Dr. Filippo Rijli, Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France
Nous tenons à remercier particulièrement Jean-Luc Vonesch et
Didier Hentsch de l'Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire
et Cellulaire (IGBMC), Illkirch, France pour leur étroite collaboration
dans le cadre du développement du MacroFluo™ de Leica
2
➊
➋
➌
➍
➎
➏
➐
3
Quand excellence et
brillance vont de pair
Documentation sans parallaxe
• Représentation précise des préparations macroscopiques, de l'image
globale jusque dans le moindre détail
• Analyse exacte des détails et représentation 3D
Du macro au micro
• Systèmes de zoom manuels ou motorisés 6:1 et 16:1 à correction apochromatique pour une d'adaptation
optimale
• Zoom 6:1 à grande ouverture numérique pour un rendement lumineux
optimal
• Zoom 16:1 permettant de couvrir un
large spectre d'application avec un
seul instrument
• Représentation optimale de vos
échantillons grâce au large choix
d'objectifs de haute qualité
4
De construction modulaire, le système
MacroFluo™ de Leica permet une adaptation
individuelle aux tâches à exécuter pour une
représentation précise de toutes les facettes
de la préparation macroscopique.
Macroscopie en fluorescence sans parallaxe
Tandis qu'en stéréomicroscopie, du fait d'un
changement de la position z de l'observateur,
une erreur de parallaxe, c.-à-d. un décalage
latéral de l'objet, est associée à la prise
de vue des piles Z, le MacroFluo™ de Leica
associe l'observation macroscopique à un
trajet optique vertical caractéristique pour
les microscopes. Ceci permet d'obtenir des
reproductions sans parallaxe tout en ayant
de grandes distances de travail et de grands
champs d'objet, et ce avec une précision
maximale. Les résultats obtenus lors du traitement numérique et de l'analyse des images
et lors des mesures sont bien plus précis.
MacroFluo™ Z6 APO (A) de Leica : résolution
macro élevée et fluorescence puissante
Le Z6 APO (A) de Leica est disponible en tant
que zoom 6.3:1, manuel ou motorisé, à correction entièrement apochromatique qui, selon
les possibilités offertes par l'objectif, peut
atteindre une résolution macro de 351 lp/mm
(Planapo 1×) à 1500 lp / mm (Planapo 5× HR)
et ainsi traiter des échantillons d'une largeur
de structure max. de 330 nm. La large gamme
d'objectifs à correction planapochromatique
garantit un espace suffisant pour la manipulation des échantillons et permet, grâce à la
grande ouverture numérique, de réaliser une
documentation performante d'échantillons
fluorescents à un faible grossissement.
La motorisation du zoom, du diaphragme iris
et de la mise au point fine intégrée ainsi que
la nouvelle mise au point motorisée facilitent
l'automatisation des procédures de tests. Les
résultats peuvent être reproduits à tout moment.
MacroFluo™ Z16 APO (A) de Leica : analyses
de fluorescence au plus haut niveau
Le Z16 APO (A) de Leica est également disponible en tant qu'instrument manuel ou motorisé. Avec une plage de zoom de 7.1× à 115×
(Planapo 1×), il est possible d'observer et de
documenter des échantillons fluorescents
d'une largeur de structure max. de 330 nm
(Planapo 5× HR). Le Z16 APO (A) permet par
exemple d'examiner des embryons de poules
et des systèmes nerveux aux contours nets
mais aussi de réaliser avec précision le suivi
de détails sélectionnés tels que l'expression
de protéines, avec un grossissement et une
résolution élevés.
5
Images fluorescentes brillantes,
riches en détails et en contrastes
• Couplage directe de l'éclairage et du
zoom optique : rendement lumineux
maximal et éclairage homogène des
champs d'objet
• Filtres adaptés à vos échantillons :
flexibilité maximale concernant la
sélection de colorants fluorescents
• Propriétés de transmission optimisées en fonction des échantillons et
filtres avec Zero-Pixel-Shift : pour
des images extrêmement nettes
Sources de lumière sans ajustage : vos échantillons sous leur
meilleur jour
• Leica EL6000 : Éclairage homogène
des champs d'objet avec commande
logicielle de l'obturateur pour la
documentation de séries d'images
• Leica SFL100 : Éclairage à LED compact, à durée de vie élevée et bon
marché avec réglage de l'intensité
lumineuse pour une qualité d'image
optimale
• Leica SFL4000 : 5 modules LED librement combinables pour l'excitation
spécifique de fluorochromes : efficacité lumineuse élevée pour des
images riches en contrastes et une
réduction de la phototoxicité
Puissant même avec une
faible fluorescence
La fluorescence sans compromis
Le MacroFluo™ de Leica est équipé d'un axe de fluorescence de haute qualité garantissant
un flux lumineux optimal et ainsi une luminosité et une homogénéité maximales. La tourelle
rotative peut recevoir jusqu'à cinq blocs de filtres. L’éclairage est couplé à l’optique du zoom.
Cela garantit à chaque position de zoom une conduction exacte de la lumière, un rendement
lumineux maximal et des champs d'objet homogènes.
Filtrez le meilleur de vos échantillons
Les nouveaux colorants fluorescents et les nouvelles méthodes de coloration ouvrent toujours
des perspectives entièrement nouvelles pour l'explication des étapes du développement, des
réactions, des transferts de signaux ou des voies métaboliques. À cet effet, la large gamme de
blocs de filtres Leica peut être complétée par des blocs de filtres combinés individuellement,
afin de garantir des propriétés de transmission optimales pour toutes les applications. Lors de
la commutation des blocs de filtres, aucun décalage de pixels ne se produit entre les images
individuelles des diverses plages spectrales, et ce grâce à la technologie Zero-Pixel-Shift : une
condition idéale pour les expériences numériques en fluorescence multicolore.
Que la lumière soit
Avec le dispositif EL6000 de Leica, Leica Microsystems propose une source de lumière externe
équipée d'une lampe aux halogénures longue durée : une solution alternative bon marché et
permettant de gagner du temps par rapport à la lampe à vapeur de mercure. Par ailleurs, le
SFL100 de Leica permet d'utiliser un éclairage fluorescent à LED compact et bon marché fournissant une excitation optimale à 470 nm avec une intensité lumineuse réglable. Pour combiner
aisément différentes longueurs d'ondes lors d'expériences à fluorescence multiple, le SFL4000
de Leica propose cinq modules à fluorescence performants commandés par une interface utilisateur intuitive. Toutes les sources de lumière mentionnées ici permettent une adaptation sans
ajustement au microscope et garantissent ainsi des images fluorescentes riches en contrastes
et bénéficiant d'un éclairage homogène : vos recherches apparaissent sous leur meilleur jour.
➊ – ➌ Expression de la GFP dans l'aile d'une poule. Institut Albert Bonniot,
Grenoble, France
➍
Souris transgénique avec expression de la GFP. Dr. Daniel Metzger,
Pr. Pierre Chambon, Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France
➎ – ➏ Poisson zèbre. Représentation du contraste par polarisation en
fausse couleur. Imaging Centre de l'IGBMC, Illkirch, France
➐
6
Poisson zèbre, larve. Expression de la GFP CD41 dans les thrombocytes. Prise de vue avec chronorupteur de la circulation des thrombocytes pour la représentation du système vasculaire. Dr. Philippe
Herbomel, Institut Pasteur, Paris, France
➊
➍
➋
➌
➎
➏
7
Équipé pour les travaux futurs
Des bases solides pour vos recherches
Une documentation exigeante, en particulier pour les détails
les plus fins, requiert des bases solides. La structure de la
nouvelle colonne de mise au point, extrêmement robuste d'un
point de vue mécanique, ainsi que le support de l'axe de fluorescence absorbent de façon sûre les chocs et les vibrations
de sorte que vous ne constaterez aucune dégradation de la
qualité de l'image, même lors d'examens microscopiques
d'échantillons en milieu liquide.
Mise au point motorisée et SmartTouch : mise au point
sûre et précise permettant de reproduire les résultats à
100 % grâce au pilotage du logiciel LAS
™
Coulisseau d'objectif (ici avec objectif 2× et 5×) : élargissement confortable du domaine d'application grâce à la
commutation aisée entre les grossissements requis
Tube photo binoculaire avec redressement de l'image :
manipulation aisée et réglage sûr de la section d'image
pour la documentation
8
La mécanique de haute qualité de la commande de mise au
point rapide/fine permet de réaliser une mise au point régulière en tout confort et garantit, à tout moment, un réglage
exact de la mise au point, même sur la plage des micromètres.
Grâce à la nouvelle mise au point motorisée de Leica, vous
pouvez non seulement réaliser une mise au point rapide et
précise sur vos échantillons, mais vous pouvez également en
reproduire les résultats. La documentation précise et sans
parallaxe des séries Z devient un véritable jeu d'enfants avec
la mise au point motorisée.
Performance maximale pour vos recherches
Avec la large gamme d'objectifs à correction planapochromatique et la possibilité d'adaptation d'objectifs DM, le MacroFluo™ de Leica offre une flexibilité extraordinaire en termes de
grossissement et de distance de travail. L'objectif Planapo 5×
extrêmement puissant offre, pour une ouverture numérique de
0.5 et une résolution de 1500 lp/mm, un rendu exact et brillant
de vos résultats de recherches. Le coulisseau d'objectif pour
zooms manuels permet de combiner les objectifs planapo
de 2× et 5× pour un élargissement confortable du domaine
d'applications. Du grossissement faible jusqu'au moindre détail : le MacroFluo™ de Leica offre des lentilles convergentes
puissantes pour les examens à fluorescence rayonnante tout
en octroyant suffisamment d'espace pour la manipulation
d'échantillons.
La base d'une documentation réussie
Leica Microsystems propose un large choix de socles de diascopie puissants qui font apparaître vos échantillons sous leur
meilleur jour avec l'éclairage en fond clair, à un degré de diffusion faible ou élevé, l'éclairage diascopique oblique et le fond
noir. Le procédé de contraste de relief Rottermann assure, en
outre, une excellente représentation, y compris des cellules
vivantes, non colorées.
La platine à glissement (en option) sert à positionner les
échantillons avec délicatesse. De plus, l'intégration de la platine motorisée IsoPro™ de Leica permet une exécution précise
des expériences à positions multiples jusqu'au balayage mosaïque (TileScan), y compris de grands échantillons. Le système de thermocontrôle Leica MATS avec platine porte-objets
chauffante en verre optique fournit une température absolument stable et propice à la préservation des cellules sur toute
la surface de travail. La température stable sur une longue
période permet de réaliser avec exactitude des expériences
dans le temps sur des échantillons sensibles à la température.
Investissement pour l'avenir
La faculté d'adaptation est un critère essentiel dans les environnements multi-utilisateurs afin de satisfaire aux exigences
des divers domaines de recherche. Sur ce point précisément,
un système Leica MacroFluo™ est un investissement rentable
à long terme. Grâce à la construction modulaire, vous disposez d'une gamme d'accessoires complète pour les systèmes
de zoom manuels et motorisés.
Socles Leica TL : de la diascopie simple à l'éclairage
oblique en passant par le contraste de relief, avec les
socles Leica, tirez le meilleur de vos échantillons
Avec la platine motorisée à mouvements croisés
IsoPro™, le balayage automatique des échantillons
devient un véritable jeu d'enfants
Leica SmartTouch™ : aperçu et commande aisée des
fonctions microscopiques motorisées via le panneau
tactile et les boutons de commandes à réglage individuel
9
Solutions complètes adaptées
aux besoins personnels
Solution complète intégrée
Dans le logiciel Leica Application Suite (LAS), les microscopes
automatiques, caméras numériques et logiciels sont combinés dans une solution d'imagerie conviviale et cohérente. La
polyvalence et la structure modulaire appropriée garantissent
la flexibilité de l'assemblage d'un système microscopique
assorti de façon optimale à vos applications. La solution logicielle LAS offre une solution intuitive facilitant aussi bien les
travaux de routine que les analyses de recherche.
Leica MM AF
Leica MM AF powered by MetaMorph® est disponible en version en ligne MM AF pour le traitement et l'analyse des images
et en tant que progiciel complet pour l'acquisition d'images et
l'analyse. Ce dernier offre une flexibilité et une polyvalence
maximales en termes d'intégration du microscope, des périphériques et de la caméra pour les acquisitions, le traitement
et l'analyse d'images multidimensionnelles.
Les modules optionnels tels que la Déconvolution 3D ou les
Mesures 3D ainsi que divers modules d'application pour
l'analyse de fluorescence automatique permettent d'adapter
le système microscopique aux exigences de vos travaux de
recherche.
Captures d'écran de Leica LAS et MM AF powered by Metamorph®
(de haut en bas) :
Module Multifocus LAS : Drosophila melanogaster. Œil à facettes.
Dr. Tricoire, Institut Jacques Monod, Université de Paris, France
Analyse 3D du mouvement MM AF de Leica : Trajectoires de cinq particules
identifiées. Pr. Marianne Quiding-Järbrink, Department of Microbiology and
Immunology, The Sahlgrenska Academy, University of Gothenburg, Suède
Analyse 3D du mouvement MM AF de Leica : Représentation graphique de
l'analyse
10
Le spécialiste des applications de fluorescence
Avec le AF6000 de Leica, c'est un logiciel de fluorescence
d'une ergonomie exceptionnelle que Leica Microsystems a
développé en collaboration avec des scientifiques. Le concept
de manipulation intuitif vous permet d'accéder facilement et
en toute fiabilité à des résultats brillants. Combiné aux modules de zoom motorisés du MacroFluo™, le logiciel AF6000 E
de Leica pour débutants permet de réaliser aisément la documentation, la superposition d'images "time-lapse".
La structure modulaire du logiciel permet ainsi à tout moment
de compléter votre système en fonction de vos besoins. Ainsi
le AF6000 de Leica satisfait à d'autres applications de fluorescence : la commande de l'obturateur EL6000 permet de
combiner la fluorescence multicanal manuelle avec les séries chronologiques et les séries Z. L'intégration de la platine
motorisée à mouvements croisés IsoPro™ de Leica permet de
réaliser des expériences multi-positions et un balayage mosaïque ainsi que l'acquisition WellPlate en option.
Une multitude de fonctions destinées à la documentation des
images, la quantification, l'optimisation et l'analyse peuvent
être complétées par des options logicielles telles que la reconstruction 3D d'informations sur les images ou la Déconvolution. Le MacroFluo™ fait partie d'un système microscopique
intégré qui est en mesure d'évoluer avec les exigences de vos
travaux de recherche.
Captures d'écran du logiciel AF6000 de Leica
(de haut en bas)
AF6000 : Galerie d'images en mode acquisition
AF6000 : Balayage mosaïque en mode configuration
AF6000 : Module d'acquisition WellPlate en mode configuration
11
Leica Microsystems opère à l’échelle globale en quatre
divisions qui occupent une position de tout premier plan
dans leur segment respectif.
• Life Science Division
La division Sciences de la Vie répond aux besoins d’imagerie
des scientifiques par une très grande capacité d’innovation et un savoir-faire technique reconnu dans le domaine
de la visualisation, la mesure et l’analyse des microstructures. De part sa connaissance approfondie des applications biologiques, la division fait bénéficier ses clients
d’une avance scientifique décisive.
• Industry Division
En proposant des systèmes d’imagerie innovants et de
qualité pour l’observation, la mesure et l’analyse des microstructures, la division Industrie de Leica Microsystems
accompagne ses clients dans leur recherche de qualité et
de résultats optimaux. Ses solutions sont utilisées aussi
bien pour des tâches de routine ou de recherche, qu’en
science des matériaux, en contrôle-qualité, en criminalistique et pour l’éducation.
• Biosystems Division
La division Biosystèmes de Leica Microsystems offre aux
laboratoires et instituts de recherche spécialisés en histopathologie une gamme complète de produits performants.
Il y a ainsi pour chaque tâche spécifique en histologie le
produit adéquat – pour le patient comme pour le pathologiste. Des solutions de gestion électronique de processus d’une productivité élevée sont disponibles pour tout
l’environnement du laboratoire. En offrant des systèmes
d’histologie complets reposant sur une automatisation innovante et pourvus des réactifs Novocastra™, la division
Biosystèmes favorise un excellent suivi des patients grâce
à des capacités de traitement rapides, des diagnostics
fiables et une collaboration étroite avec ses clients.
• Surgical Division
La division Chirurgie accompagne les microchirurgiens
dans leur suivi des patients. Elle est un partenaire innovant qui met à la disposition des chirurgiens des microscopes chirurgicaux de grande qualité répondant à leurs
besoins actuels et futurs.
www.leica-microsystems.com
www.leica-microsystems.com
La force d’innovation de Leica Microsystems est fondée depuis toujours sur une fructueuse
collaboration « avec l’utilisateur, pour l’utilisateur ». Sur cette base, nous avons développé nos
cinq valeurs d’entreprise : Pioneering, High-end Quality, Team Spirit, Dedication to Science et
Continuous Improvement. Vivre pleinement ces valeurs signifie pour nous : Living up to Life.
Active mondialement
Allemagne :
Wetzlar
Angleterre :
Milton Keynes
Tél. +44 1908 246 246
Fax +44 1908 609 992
Australie :
North Ryde
Tél. +61 2 8870 3500
Fax +61 2 9878 1055
Autriche :
Vienne
Tél. +43 1 486 80 50 0
Fax +43 1 486 80 50 30
Belgique :
Groot Bijgaarden
Tel. +32 2 790 98 50
Fax +32 2 790 98 68
Canada :
Richmond Hill/Ontario
Tél. +1 905 762 2000
Fax +1 905 762 8937
Corée :
Séoul
Tél. +82 2 514 65 43
Fax +82 2 514 65 48
Danemark :
Ballerup
Tél. +45 4454 0101
Fax +45 4454 0111
Espagne :
Barcelone
Tél. +34 93 494 95 30
Fax +34 93 494 95 32
Etats-Unis :
Bannockburn/Illinois
Tél. +1 847 405 0123
Fax +1 847 405 0164
France :
Nanterre Cedex
Tél. +33 811 000 664
Fax +33 1 56 05 23 23
Italie :
Milan
Tél. +39 02 574 861
Fax +39 02 574 03392
Japon :
Tokyo
Tél. +81 3 5421 2800
Fax +81 3 5421 2896
Pays-Bas :
Rijswijk
Tél. +31 70 4132 100
Fax +31 70 4132 109
Portugal :
Lisbonne
Tél. +351 21 388 9112
Fax +351 21 385 4668
Rép. populaire de Chine :
Hong-Kong
Tél. +852 2564 6699
Fax +852 2564 4163
Singapour
Tél. +49 64 41 29 40 00
Fax +49 64 41 29 41 55
Tél. +65 6779 7823
Fax +65 6773 0628
Suède :
Kista
Tél. +46 8 625 45 45
Fax +46 8 625 45 10
Suisse :
Heerbrugg
Tél. +41 71 726 34 34
Fax +41 71 726 34 44
et des agences dans plus de 100 pays
Comme l’atteste le certificat ISO 9001, Leica Microsystems (Suisse) SA, Industry Division, dispose
d’un système de gestion conforme aux exigences de la norme internationale de gestion de la
qualité. La production satisfait en outre aux exigences de la norme internationale ISO 14001 pour
la gestion de l’environnement.
Numéro de commande: Français ??? ??? • ??/10/???/????
LEICA and the Leica Logo are registered trademarks of Leica Microsystems IR GmbH.
« Avec l’utilisateur, pour
l’utilisateur » – Leica Microsystems
10 M1-000-0fr
Leica
Microsystems
(Suisse)
• CH-9435
Heerbrugg,
2009
• Imprimé
Suisse
– IV.2009
– RDV
– Les
illustrations,
descriptions
données
techniques
sont
sans
engagement
notre
part
peuvent
être
modifiées
sans
préavis.
10LSZ10010FR
• ©• ©
Leica
Microsystems
(Suisse)
SASA
• CH-9435
Heerbrugg,
2010
• Imprimé
enen
Suisse
– III.2010
– RDV
– Les
illustrations,
descriptions
et et
données
techniques
sont
sans
engagement
dede
notre
part
et et
peuvent
être
modifiées
sans
préavis.
GA und Prospekt SM
fr_farbig
04.01.2010
">